Page 5 - SOP Uji ELISA NSP PMK
P. 5

1.4  UJI ELISA UNTUK DETEKSI ANTIGEN dan ANTIBODI PMK
                   Uji ELISA untuk deteksi antibodi PMK pada sampel serum darah, dapat dilakukan dengan 2 metoda

                   yaitu metode ELISA Non Struktural Protein (NSP) dan metoda ELISA Liquid Phase Blocking (LBP).
                   ELISA NSP adalah metoda ELISA yang digunakan untuk screening antibodi PMK pada sampel serum
                   pada hewan yang terpapar virus lapangan. sedangkan ELISA LPB untuk konfirmasi spesifik antibody

                   terhadap A,O atau Asia. Protein NSP PMK adalah antigen protein yang terdapat dalam virus PMK.
                   Protein NSP ini tidak terdapat dalam virus PMK yang digunakan sebagai vaksin PMK karena protein
                   tersebut  hilang  pada  waktu  proses  inaktivasi  virus  untuk  vaksin.  Sampel  positif  tidak  akan

                   menunjukkan adanya perubahan warna (tetap bening) apabila direaksikan dengan substrat TMB dan
                   stopper.


              2.   PrioCHECK FMDV NS KIT
                   2.1  PERALATAN

                   Beberapa peralatan yang digunakan adalah:
                   a.  Waterbath
                   b.  Elisa Reader (Multiskan   FC Microplate Photometer, Thermo Fisher Scientific).
                                              TM
                   c.   Komputer
                                                         TM
                   d.  ELISA Well Wash (Thermo Scientific ),
                   e.  Shaker,
                   f.   Singlechannel pipet,
                   g.  Multichannel pipet,

                   h.  Mikropipet stand,
                   i.   Microtip 5000 µl, 1000 µl, 200 µl, dan 100 µl.

                   j.   Refrigerator, tabung effendorf

                   2.2 BAHAN UJI

                    Reagensia
                    Bahan Uji ELISA untuk deteksi antibody menggunakan Kit ELISA PrioCHECK FMDVNS buatan Thermo
                    Fisher Scientific yang didalamnya berisi:

                    Test plate (5), conjugate, dilution buffer, additive, demineralize water, washing fluid, positive control,
                    weak positive control, negative control, chromogen (TMB) substrate, stop solution  dan certificate
                    analyse.







                       SOP UJI NONSTRUCTURAL PROTEIN (NSP) PMK Balai Besar Veteriner Farma Pusvetma 2020 Rev 2022 | 5
   1   2   3   4   5   6   7   8   9   10