Page 5 - SOP Uji ELISA SP PMK Serotipe O

1.4. UJI ELISA UNTUK DETEKSI ANTIGEN dan ANTIBODI PMK
Uji ELISA untuk deteksi antibodi PMK pada sampel serum darah, dapat dilakukan dengan 2 metoda

yaitu metode ELISA Non Struktural Protein (NSP) dan metoda ELISA Liquid Phase Blocking (LBP).
ELISA NSP adalah metoda ELISA yang digunakan untuk screening antibodi PMK pada sampel serum
pada hewan yang terpapar virus lapangan. sedangkan ELISA LPB untuk konfirmasi spesifik antibody

terhadap A, O atau Asia. Protein NSP PMK adalah antigen protein yang terdapat dalam virus PMK.
Protein NSP ini tidak terdapat dalam virus PMK yang digunakan sebagai vaksin PMK karena protein
tersebut hilang pada waktu proses inaktivasi virus untuk vaksin. Prosedur NSP Elisa yang digunakan

sesuai petunjuk penggunaan dari Kit ELISA NSP PrioCHECK FMDVNS buatan Thermo Fisher Scientific,
Pirbright. Sedangkan Prosedur Elisa Kompetitif Structural Protein (SP) berdasarkan Petunjuk
®
Penggunaan yang terdapat pada KIT ELISA dari ID.VET, ID Screen FMD Type A dan O Competition.
Pemeriksaan dilakukan sebagai screening test Competitive Elisa untuk deteksi antibodi terhadap virus
Penyakit Mulut dan Kuku (PMK) serotipe A dan O (Penggunaan secara in vitro). Sampel positif tidak

akan menunjukkan adanya perubahan warna (tetap bening) apabila direaksikan dengan substrat TMB
dan stopper. Metode tersebut dapat digunakan untuk serum (atau plasma) dari sapi, domba, kambing,
babi atau spesies rentan lainnya.

®
2. ID Screen FMD Type O Competition – iD.vet KIT
Prosedur ini didasarkan pada Petunjuk Penggunaan yang terdapat dalam KIT ELISA dari ID.VET, ID
Screen® FMD Type O Competition. Pemeriksaan dilakukan sebagai uji skrining Elisa Kompetitif untuk
deteksi antibodi terhadap virus Penyakit Mulut dan Kuku (PMK) serotipe O (in vitro use).

2.1 Informasi Umum

Kit diagnostik ini dirancang untuk mendeteksi antibodi terhadap virus Penyakit Kaki dan Mulut
(FMDV) serotipe O oleh ELISA kompetitif.
Metode ini sesuai untuk serum atau plasma dari sapi, domba, kambing, babi dan semua

spesies yang rentan.

2.2 Deskripsi dan Prinsip
• Microwell dilapisi dengan antigen FMDV tipe O yang tidak menular.

• Sampel yang akan diuji dan kontrol ditambahkan ke microwells. Antibodi anti-serotipe O,
jika ada, membentuk kompleks antigen-antibodi yang menutupi epitop virus.

• Konjugat anti-serotipe O lobak peroksidase (HRP) ditambahkan ke sumur. Ini memperbaiki
epitop bebas yang tersisa, membentuk kompleks antigen-konjugat-HRP.

SOP UJI ELISA SP PMK Serotipe O Balai Besar Veteriner Farma Pusvetma 2022 | 5