Page 5 - SOP VN Test PMK
P. 5
▪ Spidol, permanent
▪ Fintip disposibel 10 – 100 µl, 100 – 1000 µl
▪ Microplate datar
▪ Tabung flash 250 ml
▪ Flask
2.2 BAHAN UJI
Bahan yang digunakan antara lain:
▪ Sel BHK21
▪ Seed PMK
▪ Serum yang akan diuji
▪ Asam sitrat cair
▪ Alkohol,
▪ Serum kontrol/ serum referensi positif dan negatif,
▪ Phosphat buffer saline - (PBS-)
▪ HEPES,
▪ Advance minimum eagle medium (MEM),
▪ Versene tripsin (VT),
▪ 10% fetal bovine serum (FBS)
▪ Glycerol
▪ Kantong plastik dan plastik autoclavable
2.3 PROSEDUR
Metode Titrasi Virus
1. Masukkan 50 µL media ke dalam setiap well ke 2, untuk well pertama diisi dengan virus
100TCID50 sebanyak 100 µL
2. Lakukan pengenceran mulai well ke 2 dst sampai well ke 10, well ke 11 dan 12 bisa kita
gunakan untuk kontrol sel, media dan back titrasi
3. Masukkan sel yang sudah dihitung dan split sebanyak 50 µL
4. Masukkan kedalam incubator CO2
5. Lakukan pengamatan selama 24 sampai 72 jam
SOP UJI NETRALISASI VIRUS (VNT) PMK Balai Besar Veteriner Farma Pusvetma 2023 | 5