Page 6 - SOP Uji ELISA LPB PMK

3. BAHAN UJI
3.1. Reagensia
Bahan Uji ELISA untuk deteksi antibody menggunakan Kit ELISA LPB dari Phirbright, terdiri

dari : Trapping Antibody (Rabbit anti FMDV serotype O,A, dan Asia 1); Control Antigen (FMDV
serotype O, A dan Asia 1); Control Sera (Anti FMD serotype O, A, dan Asia 1); Detecting

Antibody (Guinea pig anti FMDV serotype A, O, dan Asia 1); Anti spesies Conjugate
(horseradish peroxidase-conjugated rabbit anti guinea pig immunoglobulin); Coating buffer
(carbonate/bicarbonate capsule); Wash diluent (PBS tablet), Blocking Detergent (Tween 200

; Blocking Agen ( skim milk powder); Substrat (Hydrogen peroxidase tablets); Crhomogen
(Ortho phenylenediamine (OPD) tablet; Recontstitution Diluent (air denan 0,02%

merthiolate); reconstitution diluent 2 ( air dengan glycerol dan 0,02% merthiolate;
Chromogen Buffer; Microplates (Nunc Immunoplate 1 Maxisorp dan U Bottom 96 well
microplates.

3.2. Contoh Uji
Contoh uji untuk pemeriksaan ELISA PMK adalah serum darah sapi, kambing, domba atau

babi. Semua contoh uji harus dianggap berbahaya mengandung virus PMK sehingga
penanganan pengujian dilakukan sesuai dengan standard Biosafety dan Biosecurity
laboratorium PMK.

3.3. Bahan Acuan
3.3.1. Kontrol Antigen FMDV serotype O, A, dan Asia 1
3.3.2. Kontrol Sera Anti FMDV serotypes O, A, dan Asia 1

4. PERSIAPAN

4.1. Kualifikasi Penguji

Penguji adalah petugas yang terlatih melakukan pengujian ELISA PMK dan bersertifikat
melaksanakan pengujian ELISA PMK yang dikeluarkan oleh Pusvetma dan ditunjuk oleh
Kepala Balai. Walaupun PMK bukan penyakit zoonosis tetapi untuk menjamin keamanan,

maka pengujian PMK harus dilakukan pada biosafety containment laboratorium yang sesuai
dengan pengujian ELISA PMK.

4.2. Pembuatan Larutan

Persiapan pengujian dilakukan dengan mengikuti acuan dari Kit ELISA (lihat cara penggunaan

Kit – usage guideline) dan arahan Pusvetma sbb:

SOP UJI LIQUID PHASE BLOCKING (LPB) PMK Pusat Veteriner Farma 2020 | 6