Page 7 - SOP Uji ELISA LPB PMK

a. Trapping antibody Stocks
b. Detecting antibody stock
c. Anti-Spesies Conjugate Stock

d. Antigen Stocks
e. Control serum Stocks

f. Chromogen Buffer
g. Chromogen Substrat
h. Substrat Stock

i. Coating buffer
j. Diluent Buffer A

k. Diluent Buffer B
l. Wash buffer
m. Stopping Solution

n. Test Sera
o. Desinfectan

4.3. Persiapan contoh uji
Semua contoh uji harus dianggap berbahaya, sehingga penanganan sampel harus dilakukan
secara hati2 dan bahan kimia (biohazard) seperti Virkon harus tersedia untuk mensterilkan

semua bahan habis pakai.

5. PROSEDUR

1. Trapping antibody, serum kontrol, guinea pig, conjugate, stok substrat, stok chromogen,
recontitution diluent#1 dan recontitution diluent#1 disimpan dalam refrigerator (suhu 1 s.d.
8 C). Buffer carbonas, PBS, Tween 20, phospate citrat buffer, dan stopper disimpan dalam suhu
0
ruangan. Skim milk powder dan serum sampel disimpan dalam freezer ( suhu -30 s.d. -5 C)
0
0
sedangkan kontrol antigen disimpan dalam deep freezer (suhu -90 s.d. -50 C)
2. ELISA plate dicoating dengan 50 µl/lubang trapping antibody (rabbit antiserum) yang sudah
diencerkan dengan coating buffer, dan diinkubasi semalam dalam 1-8 C.
0
3. Sampel, serum kontrol dan antigen dipersiapkan dengan Diluent Buffer A.

4. Serum sampel dan kontrol diencerkan 1:16, dan antigen diencerkan sesuai dengan titer antigen
tersebut.

5. Serum sampel dan kontrol yang sudah diencerkan ditambahkan dengan antigen yang sudah
diencerkan dalam transfer plate.

SOP UJI LIQUID PHASE BLOCKING (LPB) PMK Pusat Veteriner Farma 2020 | 7