Page 8 - SOP Uji ELISA LPB PMK
P. 8
6. Diinkubasi di atas shaker dalam inkubator 37 C selama 1 jam, setelah itu diinkubasi semalam
0
dalam 1-8 C.
0
7. ELISA plate dicuci 3 kali dengan PBS.
8. Campuran sampel dan antigen dipindahkan 50 µl dari transfer plate ke ELISA plate.
0
9. Diinkubasi di atas shaker dalam inkubator 37 C selama 1 jam.
10. ELISA plate dicuci 3 kali dengan PBS.
11. Serum guinea pig yang diencerkan dengan Diluent Buffer B diisikan 50 µl/lubang.
0
12. Diinkubasi di atas shaker dalam inkubator 37 C selama 1 jam.
13. ELISA plate dicuci 3 kali dengan PBS.
14. Conjugate yang sudah diencerkan dengan Diluent Buffer B diisikan 50 µl/lubang.
0
15. Diinkubasi di atas shaker dalam inkubator 37 C selama 1 jam.
16. Substrat dipersiapkan, tetapi jangan diaktivasi.
17. ELISA plate dicuci 3 kali dengan PBS.
18. Substrat diaktivasi dengan ditambahkan H2O2 dan diisikan 50 µl/lubang dan diinkubasi 15 menit
dalam suhu ruang.
19. Reaksi substrat dihentikan dengan penambahan larutan stopper 50 µl/lubang.
20. Nilai OD dan hasil ELISA dibaca dengan menggunakan ELISA reader dengan panjang
gelombang 492 nm.
6. HASIL
Rumus berdasarkan FMD Elisa Kit Liquid Phase Blocking Immunoassay, Pirbright, adalah :
PI= 100 - (OD rata- rata sampel serum x 100)
OD rata-rata kontrol antigen
Interpretasi hasil adalah :
PI > 50 : negatif
PI < 50 : positif
7. RETENSI DAN PEMUSNAHAN SAMPEL/BIOSAFETY & BIOSECURITY
Peralatan dan bahan sisa Elisa LPB PMK harus didesinfeksi dan di dekontaminasi dengan
menggunakan autoclave.
SOP UJI LIQUID PHASE BLOCKING (LPB) PMK Pusat Veteriner Farma 2020 | 8
