Page 13 - SOP Uji ELISA NSP PMK
P. 13
3. Kosongkan wells. Cuci setiap well 5 kali dengan setidaknya 300 μL Wash Solution. Hindari mengeringkan
wells di antara pencucian.
Serum and plasma: overnight incubation
1. Tambahkan:
- 90 μl Dilution Buffer 18 untuk setiap well.
- 10 μl Kontrol Positif ke well A1 dan B1.
- 10 μl Kontrol Negatif ke well C1 dan D1.
- 10 μl dari setiap sampel yang akan diuji di well yang tersisa.
2. Tutup plate dan inkubasi selama 16-20 jam pada suhu 21°C (± 5°C).
3. Kosongkan wells. Cuci setiap well 5 kali dengan setidaknya 300 μl Wash Solution. Hindari mengeringkan
wells di antara pencucian.
Untuk semua protokol:
4. Siapkan Conjugate 1X dengan mengencerkan Concentrated Conjugate 10X hingga 1:10 dalam Dilution
Buffer 13.
5. Tambahkan 100 μl Conjugate 1X ke masing-masing well.
6. Tutup plate dan inkubasi selama 30 menit ± 3 menit pada suhu 21°C (±5°C).
7. Kosongkan wells. Cuci setiap well 5 kali dengan setidaknya 300 μL Wash Solution. Hindari mengeringkan
wells di antara pencucian.
8. Tambahkan 100 μL Substrate Solution ke setiap well.
9. Tutup plate dan inkubasi selama 15 menit ± 2 menit pada suhu 21°C (±5°C) dalam gelap.
10. Tambahkan 100 μL Stop Solution ke setiap well dalam urutan yang sama seperti pada langkah No. 8,
untuk menghentikan reaksi.
11. Baca dan rekam OD pada panjang gelombang 450 nm.
SOP UJI NONSTRUCTURAL PROTEIN (NSP) PMK Balai Besar Veteriner Farma Pusvetma 2020 Rev 2022 | 13
