Page 12 - SOP Uji ELISA NSP PMK
P. 12

2.  Substrate solution dapat mengiritasi kulit.
                   3.  Mengandung  komponen  yang  dapat  berbahaya  bagi  kulit  dan mata serta  dapat menimbulkan

                       sensitisasi jika bersentuhan dengan kulit. Hindari kontak dengan kulit dan mata (substrate and
                       stop solution). Gunakan jas lab pelindung, sarung tangan satu arah, dan kacamata pengaman.
                       Stop solution (asam 0,5 M) bisa berbahaya jika tertelan.

                   4.  Jangan biarkan substrate solution terkena cahaya terang atau zat pengoksidasi.
                   5.  Semua limbah harus didekontaminasi dengan benar sebelum dibuang sesuai dengan peraturan
                       yang berlaku

               Catatan:  silahkan  merujuk  ke  Material  Safety  Data  Sheet,  tersedia  berdasarkan  permintaan  di
               [email protected], untuk informasi lebih rinci.
               3.4  PERSIAPAN

               Persiapan sampel
               Untuk menghindari perbedaan waktu inkubasi antar spesimen, 96-well plate yang berisi spesimen uji dan

               kontrol, sebelum memindahkannya ke ELISA microplate menggunakan multichannel pipette.

               Persiapan larutan cuci

               Jika perlu, bawa Wash Concentrate (20X) ke suhu kamar dan aduk rata untuk memastikan bahwa Wash
               Concentrate (20X) benar-benar larut.

               Siapkan  Wash Solution  (1X)  dengan  mengencerkan  Wash Concentrate  (20  X)  hingga  1:20  dalam  air
               suling/deionisasi.
               Kualitas  langkah  pencucian  dapat  mempengaruhi  hasil.  Pastikan  wells  benar-benar  kosong  di  antara

               pencucian. Jika menggunakan washer otomatis, sangat penting untuk membuat parameter mesin dengan
               benar (mode, jenis aspirasi, tinggi aspirasi). Untuk informasi lebih lanjut, silakan baca “IDvet Washing
               Guide”, tersedia berdasarkan permintaan.


               3.5  PROSEDUR PENGUJIAN
               Biarkan semua reagen mencapai suhu kamar (21±5 °C) sebelum digunakan. Homogenisasi semua reagen

               dengan inversi atau vortex.
               Serum and plasma: short incubation

               1. Tambahkan:
                  - 50 μL Dilution buffer 18 untuk setiap well.
                  - 30 μL Kontrol Positif ke well A1 dan B1.

                  - 30 μL Kontrol Negatif ke well C1 dan D1.
                  - 30 μl dari setiap sampel yang akan diuji di well yang tersisa.

               2. Tutup plate dan inkubasi selama 2 jam ± 10 menit pada suhu 37°C (±3°C).


                      SOP UJI NONSTRUCTURAL PROTEIN (NSP) PMK Balai Besar Veteriner Farma Pusvetma 2020 Rev 2022 | 12
   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17