Page 5 - SOP Uji ELISA NSP PMK
P. 5
1.4 UJI ELISA UNTUK DETEKSI ANTIGEN dan ANTIBODI PMK
Uji ELISA untuk deteksi antibodi PMK pada sampel serum darah, dapat dilakukan dengan 2 metoda
yaitu metode ELISA Non Struktural Protein (NSP) dan metoda ELISA Liquid Phase Blocking (LBP).
ELISA NSP adalah metoda ELISA yang digunakan untuk screening antibodi PMK pada sampel serum
pada hewan yang terpapar virus lapangan. sedangkan ELISA LPB untuk konfirmasi spesifik antibody
terhadap A,O atau Asia. Protein NSP PMK adalah antigen protein yang terdapat dalam virus PMK.
Protein NSP ini tidak terdapat dalam virus PMK yang digunakan sebagai vaksin PMK karena protein
tersebut hilang pada waktu proses inaktivasi virus untuk vaksin. Sampel positif tidak akan
menunjukkan adanya perubahan warna (tetap bening) apabila direaksikan dengan substrat TMB dan
stopper.
2. PrioCHECK FMDV NS KIT
2.1 PERALATAN
Beberapa peralatan yang digunakan adalah:
a. Waterbath
b. Elisa Reader (Multiskan FC Microplate Photometer, Thermo Fisher Scientific).
TM
c. Komputer
TM
d. ELISA Well Wash (Thermo Scientific ),
e. Shaker,
f. Singlechannel pipet,
g. Multichannel pipet,
h. Mikropipet stand,
i. Microtip 5000 µl, 1000 µl, 200 µl, dan 100 µl.
j. Refrigerator, tabung effendorf
2.2 BAHAN UJI
Reagensia
Bahan Uji ELISA untuk deteksi antibody menggunakan Kit ELISA PrioCHECK FMDVNS buatan Thermo
Fisher Scientific yang didalamnya berisi:
Test plate (5), conjugate, dilution buffer, additive, demineralize water, washing fluid, positive control,
weak positive control, negative control, chromogen (TMB) substrate, stop solution dan certificate
analyse.
SOP UJI NONSTRUCTURAL PROTEIN (NSP) PMK Balai Besar Veteriner Farma Pusvetma 2020 Rev 2022 | 5