Page 5 - SOP Uji ELISA SP PMK Serotipe A

Uji ELISA untuk deteksi antibodi PMK pada sampel serum darah, dapat dilakukan dengan 2 metoda
yaitu metode ELISA Non Struktural Protein (NSP) dan metoda ELISA Liquid Phase Blocking (LBP).

ELISA NSP adalah metoda ELISA yang digunakan untuk screening antibodi PMK pada sampel serum
pada hewan yang terpapar virus lapangan. sedangkan ELISA LPB untuk konfirmasi spesifik antibody
terhadap A, O atau Asia. Protein NSP PMK adalah antigen protein yang terdapat dalam virus PMK.

Protein NSP ini tidak terdapat dalam virus PMK yang digunakan sebagai vaksin PMK karena protein
tersebut hilang pada waktu proses inaktivasi virus untuk vaksin. Prosedur NSP Elisa yang digunakan
sesuai petunjuk penggunaan dari Kit ELISA NSP PrioCHECK FMDVNS buatan Thermo Fisher Scientific,

Pirbright. Sedangkan Prosedur Elisa Kompetitif Structural Protein (SP) berdasarkan Petunjuk
®
Penggunaan yang terdapat pada KIT ELISA dari ID.VET, ID Screen FMD Type A dan O Competition.
Pemeriksaan dilakukan sebagai screening test Competitive Elisa untuk deteksi antibodi terhadap virus

Penyakit Mulut dan Kuku (PMK) serotipe A dan O (Penggunaan secara in vitro). Sampel positif tidak
akan menunjukkan adanya perubahan warna (tetap bening) apabila direaksikan dengan substrat TMB

dan stopper. Metode tersebut dapat digunakan untuk serum (atau plasma) dari sapi, domba, kambing,
babi atau spesies rentan lainnya.

2. PERALATAN
Beberapa peralatan yang digunakan adalah:

a. Waterbath
TM
b. Elisa Reader (Multiskan FC Microplate Photometer, Thermo Fisher Scientific).
c. Komputer
TM
d. ELISA Well Wash (Thermo Scientific ),
e. Shaker,
f. Singlechannel pipet,
g. Multichannel pipet,
h. Mikropipet stand,

i. Microtip 5000 µl, 1000 µl, 200 µl, dan 100 µl, 50 µl, 20 µl
j. Refrigerator, tabung effendorf
k. Inkubator 37 °C
l. Mikroplate Shaker

3. BAHAN UJI

SOP UJI ELISA SP PMK Serotipe A Balai Besar Veteriner Farma Pusvetma 2022 | 5