Page 22 - Juklak Deteksi PMK RBS di Propinsi Bebas Berbatas Pulau di Indonesia 2023

Rumus sebagai berikut :
450
PI = 100 – ( ) x 100
450
Interpretasi Hasil

OD450 max (rata-rata OD450 dari control negative) harus ˃1,000.
Rata-rata PI dari control positive lemah harus ˃ 50%.
Rata-rata PI dari control positive harus ˃70%.

Diluar ketiga kriteria diatas menunjukkan bahwa tes tidak spesifik.

Catatan :
- Jika OD450 dari sampel serum lebih tinggi daripada OD 450 max, maka PI dapat
diinterpretasikan 0%.

- Jika rata-rata OD450 dari control negative dibawah 1,000, kemungkinan chromogen
(TMB) substrat terlalu dingin. Pada kasus ini maka hangatkan substrat pada

22±3°C selama lebih dari 30 menit.

- Jika rata-rata OD450 dari control negative diatas 2,000, maka sebaiknya periode

inkubasi chromogen (TMB) substrat diperpendek.

Interpretasi PI
PI ˂ 50% → Negatif

Ini artinya tidak ada antibodi terhadap protein NS virus PMK dalam serum sampel.
PI ≥ 50% → Positif

Ini artinya ada antibodi terhadap protein NS virus PMK dalam serum sampel

C. Respon Terhadap Hasil Uji Yang Positif
Apabila ditemukan hasil positif maka uji akan diulang, dan apabila masih diperoleh
hasil positif maka sampel serum tersebut dilacak asal hewan dan daerahnya untuk

dilakukan pengambilan sampel lanjutan berupa darah dan spesimen yang lain.
Pengambilan juga dilakukan di ternak lain yang berada di sekitar lokasi tersebut
yang selanjutnya dilakukan uji PCR PMK.

III.2.3.2 Pengujian Real Time Polimerase Chain Reaction (rtPCR) Deteksi
Antigenik PMK
Pengujian rtPCR PMK dilakukan sesuai protokol Standard Operasional Prosedur

rtPCR. Komponen Bahan Pengujian rt PCR antara lain yaitu :

A. Bahan Pengujian
1. AgPath-ID One Step RT-PCR Kit (Ambion)

21